外泌体的分离纯化目前主要是根据其大小和密度进行操作，常用的方法有差速离心（Differential Centrifugation）、密度梯度离心（Density Gradient Ultra-Centrifugation ）、高分子（如PEG）共沉降，尺寸排阻柱分离（SEC）、超滤（Ultra-Filtration）、亲和层析、免疫捕获、微流控等方法。各个方法对于外泌体的回收率和纯度都各有优劣，目前尚没有单一的分离纯化方法可以获得高纯度的外泌体。
DOI：10.1038/s41556-018-0250-9
根据下游实验对泌体纯度的需求不同，我们通过对各种纯化技术进行实验对比和整合，开发出适用于不同样品的分离纯化策略，可获得满足不同后续应用需求的样品纯度等级，客户可针对不同样品体积和下游应用需求选择适合的提取方法。
实验案例
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针对实验室量级的样品（50mL-1L）进行外泌体提取的案例
针对实验室量级的样品（50mL-1L）：通过对样品的前处理，依次去除培养上清中残留的活细胞、死细胞和细胞碎片。之后采用两步超离法收集样品中的外泌体，得到纯度更高的外泌体样品。随后，用户可以选择进一步的SEC纯化（基于尺寸）或密度梯度离心（基于颗粒密度和尺寸），获得超高纯外泌体。并进行对应的表征鉴定。 表征检测：TEM，Western blot，纳米流式检测。
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针对较大量级培养上清样品（1-10L）进行外泌体提取的案例
针对较大量级的培养上清样品（1-10L）外泌体提取的实验实例：我们推荐采用切向流过滤（ Tangential Flow Filtration）浓缩样品，结合超高速离心的策略进行外泌体的分离纯化。相比于普通的超滤处理，切向流过滤消除了膜堵塞的问题。选用适宜分子量的膜包材料，保障了外泌体的有效回收和对于小分子量杂质蛋白的有效去除。相比于传统的超高速离心处理，可处理样品体积大大提升，时间和人力成本大大降低。结合后续进一步超速离心处理，可以得到高纯度高浓度的外泌体样品。随后，用户可以选择进一步的SEC纯化或密度梯度离心，获得超高纯外泌体。图示为样品对应的表征鉴定结果。 表征检测：TEM，Western blot，纳米流式检测
